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2017衛(wèi)生資格檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)精華
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外周血細(xì)胞檢驗(yàn)的注意點(diǎn)
1.血液標(biāo)本的采集
血液標(biāo)本的采集,可分為毛細(xì)血管采血法和靜脈采血法。DETA-K2抗凝劑對(duì)血細(xì)胞形態(tài)影響很小,因此適用于血細(xì)胞計(jì)數(shù),特別是血小板計(jì)數(shù)。血細(xì)胞分析儀使用標(biāo)本一般要求為靜脈抗凝血,為了避免淤血和濃縮,壓脈帶壓迫時(shí)間不可過長,最好不超過半分鐘。因?yàn)槊?xì)血管標(biāo)本,受末梢血循環(huán)狀態(tài)、采血技術(shù)的影響,有時(shí)血液易形成小凝塊,堵塞機(jī)器造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
2.血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)
血液標(biāo)本在室溫中必須6 h內(nèi)上機(jī)檢測(cè),上機(jī)前一定要將血液標(biāo)本顛倒混勻至少8次,如需制備血涂片,應(yīng)在采血后3 h內(nèi)涂制。無論多先進(jìn)的血液分析儀,只能當(dāng)作一種過篩手段,不能完全替代目視法顯微鏡鏡檢,因?yàn)閮x器還不能準(zhǔn)確區(qū)分幼稚細(xì)胞、異常淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞等。因此,當(dāng)出現(xiàn)白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板明顯升高或降低,白細(xì)胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果,白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板直方圖或散點(diǎn)圖出現(xiàn)異常,均應(yīng)用顯微鏡涂片復(fù)查。
3.血涂片的制備
血涂片既可由非抗凝的靜脈血和毛細(xì)血管血制備,也可由 DETA-K2抗凝血制備,EDTA-K2抗凝血中,鈣離子被螯合后,能阻止血小板聚集,推片時(shí)血小板均勻平均,顯微鏡下易于對(duì)血小板進(jìn)行觀察評(píng)價(jià),但有時(shí)可觀察到因EDTA-K2引起的紅細(xì)胞皺縮及白細(xì)胞叢集現(xiàn)象,因此最好使用非抗凝血制備涂片,這樣可減少因抗凝劑所致的人工假象。涂片的好壞與血滴大小、推片與載片之間角度有關(guān);血膜分布不均,主要是推片邊緣不齊,用力不均或載玻片不清潔所致,將制成的血膜在空氣中揮動(dòng),使迅速干燥,以免血細(xì)胞皺縮。
4.血涂片的染色
瑞氏-姬姆薩混合染色,兩種染色法各有其優(yōu)缺點(diǎn),故在細(xì)胞學(xué)檢查中常將兩者結(jié)合起來,取長補(bǔ)短,細(xì)胞的胞質(zhì)、顆粒、核等染色均較滿意;染色環(huán)境的pH對(duì)著色影響很大,應(yīng)維持在pH值6.4~6.8,因此必須使用緩沖液;未干透血膜不能立即染色,否則染色時(shí)易脫落。
5.血涂片的鏡檢
選擇血涂片的體尾交界處染色良好的部分,在油鏡下按一定方式有規(guī)律地移動(dòng)視野,一般計(jì)數(shù)100個(gè)~200個(gè)白細(xì)胞,同時(shí)注意白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板形態(tài)的改變和分布,有無血液寄生蟲、有核紅細(xì)胞、幼稚或原始細(xì)胞、異淋細(xì)胞等。
白血病實(shí)驗(yàn)室檢查分類
1.急性白血。
①貧血程度輕重不一,但進(jìn)展迅速,多數(shù)為白細(xì)胞增多型,常大于10×109/L。亦可正;驕p低,周圍血白細(xì)胞分類可見幼稚型白細(xì)胞,血紅蛋白常小于70g/L;②骨髓增生活躍,原始細(xì)胞(原粒細(xì)胞Ⅰ型+Ⅱ型)大于30%,有核細(xì)胞顯著增生,可見白血病“裂孔出象”,紅系、巨核系統(tǒng)顯著減少;③通過化學(xué)染色、溶菌酶測(cè)定,染色體及免疫學(xué)檢查對(duì)急性白血病的診斷、分類都有一定意義。
2.慢性白血。
①白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高,可達(dá)幾萬,數(shù)十萬以上,以中、晚幼稚細(xì)胞為主,嗜酸、嗜堿性粒細(xì)胞增多,紅細(xì)胞和血紅蛋白隨病情進(jìn)展逐漸減少,血小板早期增多,晚期減少;
②骨髓呈極度增生,分類與血象大致相同,原始細(xì)胞(Ⅰ型+Ⅱ型)小于10%,紅系減少,巨核細(xì)胞系早期增多,可伴有程度不同的骨髓纖維化;
、90%以上具有特異性的ph標(biāo)記染色體。
黃疸的發(fā)生機(jī)制
黃疸是指高膽紅素血癥引起皮膚、鞏膜和粘膜等組織黃染的現(xiàn)象。正常人血清膽紅素小于1mg/dl(10mg/L),其中未結(jié)合膽紅素占80%。當(dāng)膽紅素超過正常范圍,但又在2mg/dl以內(nèi),肉眼難于察覺,稱為隱性黃疸。如膽紅素超過2mg/dl(可高達(dá)7-8mg/dl)即為顯性黃疸。
黃疸按原因可分為溶血性、肝細(xì)胞性和梗阻性黃疸;按發(fā)病機(jī)制可分為膽紅素產(chǎn)生過多性、滯留性及反流性黃疸;按病變部位可分為肝前性、肝性和肝后性黃疸;按治療觀點(diǎn)又可分為內(nèi)科性和外科性黃疸。較為合理的是按血中升高的膽紅素的類型分為高未結(jié)合膽紅素性黃疸及高結(jié)合膽紅素性黃疸兩大類,然后再按病因、發(fā)病機(jī)制等細(xì)分。
黃疸發(fā)生的機(jī)制如下:
(一)膽紅素形成過多
膽紅素在體內(nèi)形成過多,超過肝臟處理膽紅素的能力時(shí),大量未結(jié)合膽紅素即在血中積聚而發(fā)生黃疸。未結(jié)合型膽紅素形成過多的原因包括溶血性與非溶血性兩大類。臨床上任何原因引起大量溶血時(shí),紅細(xì)胞破壞釋放的大量血紅蛋白即成為膽紅素的來源。非溶血性的膽紅素形成過多則多見于無效造血而產(chǎn)生過多膽紅素。
(二)肝細(xì)胞處理膽紅素的能力下降
這包括:①肝細(xì)胞對(duì)膽紅素的攝取障礙;②肝細(xì)胞對(duì)膽紅素的結(jié)合障礙(肝細(xì)胞中葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶活性降低);③肝細(xì)胞對(duì)膽紅素的排泄障礙(肝內(nèi)膽汁淤滯、乙醇性肝炎等)。
(三)膽紅素在肝外的排泄障礙,逆流入血而引起黃疸
新生兒生理性黃疸的成因有下述幾方面:①新生兒肝細(xì)胞內(nèi)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶活性不高;②膽紅素在新生兒體內(nèi)產(chǎn)生較多;③新生兒肝細(xì)胞內(nèi)缺乏Y蛋白,故攝取膽紅素的能力
也比成人差,這些都可能促使新生兒生理性黃疸的發(fā)生。
黃疸的鑒別試驗(yàn)
、备呓Y(jié)合膽紅素性黃疸與高未結(jié)合膽紅素性黃疸的鑒別依靠結(jié)合膽紅素與未結(jié)合膽紅素的分別定量。高結(jié)合膽紅素性黃疸血中結(jié)合膽紅素增高,高未結(jié)合膽紅素性黃疸時(shí)則血中未結(jié)合膽紅素增高;高結(jié)合膽紅素性黃疸時(shí)尿中膽紅素陽性,膽素原視病因而異,可以增加(肝炎)、減少或消失(梗阻);高未結(jié)合膽紅素性黃疸時(shí),尿中膽紅素陰性,尿中膽素原增加。
、补W枧c非梗阻性(肝細(xì)胞性)高結(jié)合膽紅素性黃疸的鑒別可聯(lián)合應(yīng)用反映膽道梗阻(ALP、LAP、γ-GT、血清總膽固醇、總膽汁酸)及肝細(xì)胞損傷(ALT、AST、LDH活性、血清總蛋白及白蛋白定量等)的檢驗(yàn)指標(biāo)來加以鑒別。
、掣蝺(nèi)淤滯與肝外梗阻性黃疸的鑒別可應(yīng)用病史、肝功能試驗(yàn)、潑尼松治療試驗(yàn)、苯巴比妥治療試驗(yàn)等進(jìn)行鑒別。對(duì)于原發(fā)性膽汁性肝硬化,其發(fā)病可能與免疫機(jī)制有關(guān),膽管的抗原與來自肝門靜脈的抗體反應(yīng),并與補(bǔ)體結(jié)合在膽道被吸附,在膽道壁形成免疫復(fù)合物。原發(fā)性膽汁性肝硬化血中ALP活性增高,γ-GT及5-核苷酸酶活性增高,IgM增高,抗線粒體抗體陽性。
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