硫酸鎂對(duì)急性腦損傷后同型半胱氨酸的作用研究

　　同型半胱氨酸(homcysteine，Hey)是蛋氨酸和半胱氨酸代謝過(guò)程中的一個(gè)重要中間產(chǎn)物。近年的大量研究表明，血Hey濃度增高與心血管疾病的發(fā)生有十分密切的關(guān)系。但有關(guān)Hcy與腦損傷的研究報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠腦損傷模型，檢測(cè)了急性腦損傷后Hcy含量水平變化，并就硫酸鎂對(duì)急性顱腦損傷后的治療作用進(jìn)行了研究。

　　1 材料和方法

　　1．1 材料 選擇雄性SD大鼠45只，體質(zhì)量為21O～230 g，西安醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

　　125 g／L的硫酸鎂(無(wú)錫第七制藥廠)；Hcy測(cè)定試劑盒(北京九強(qiáng)生物技術(shù)有限公司提供)。按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組( 一5)，腦損傷組( 一20)和治療組( 一20)，其中腦損傷組與治療組按照腦損傷加重程度又分為造模后0．5，2，6和24 h 4個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只。

　　1．2 動(dòng)物分組及模型建立 將大鼠用25 g／L戊巴比妥鈉50 mg／kg腹腔注射麻醉，用改良的Feeney’s法制備腦損傷模型，其方法是將大鼠麻醉后，置動(dòng)物俯臥位固定于致傷架上，正中切開(kāi)頭皮，暴露雙側(cè)頂骨，在人字縫前方約2 mm、正中線左側(cè)2 mm處頂骨鉆孔，擴(kuò)大骨窗直徑約4 mm，暴露硬膜，固定頭顱致傷架的橫桿使致傷錘下端(直徑3 ram)緊貼硬膜，用50 g的砝碼于40 cm高處落下撞擊致傷頂端，使下端腦組織發(fā)生局限性挫裂傷。治療組傷后立即腹腔注射125 g／L的硫酸鎂600 mg／kg；大鼠造模成功后0．5，2，6和24 h后分別經(jīng)麻醉、開(kāi)胸、左心室插管取血1．5 ml，并． 置于肝素抗凝管中離心，以5 000 r／min離心5min，取上清液置于一8O℃凍存。

　　1．3 血漿Hcy濃度的檢測(cè) 使用Hitachi7180全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品均為Hitachi原裝試劑。

　　1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，差異性比較采用t檢驗(yàn)，以P<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義，以P<0．O1為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)非常顯著性意義。

　　2 結(jié)果

　　急性腦損傷30 min后，其Hey開(kāi)始升高，在損傷2 h后Hey升高較對(duì)照組(11．24±2．24~mol／L)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)非常顯著性意義(P<0．O1)，在損傷6 h后逐漸下降。損傷組與治療組比較，藥物作用2，6 h后其Hcy含量均較各損傷組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義(P<O．05)，治療24h后Hcy含量接近正常水平。

　　3 討論

　　Hey是一種含硫氨基酸，是蛋氨酸的中間代謝產(chǎn)物，在體內(nèi)由甲硫氨酸轉(zhuǎn)甲基后生成。

　　其代謝途經(jīng)主要是重甲基化途徑和甲基化的替代途徑。當(dāng)腦損傷時(shí)體內(nèi)釋放甲硫氨酸增多，致使血中的Hey含量水平升高。

　　本研究通過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)急性腦損傷后最初變化與對(duì)照組比較不明顯(P>0．05)，傷后30 minHey含量逐漸增加，與對(duì)照組比較Hcy含量水平有顯著性差異(P<0．05)，在急性腦損傷2 h后Hey含量明顯增高，較對(duì)照組差異非常顯著(P<0．01)。在損傷6 h后開(kāi)始下降，損傷24 h后降至正常。急性腦損傷后血漿中Hey含量升高呈階段性升高。可能是腦損傷后引起突觸谷氨酸釋放增加，谷氨酸通過(guò)N一甲基一I)-天門冬氨酸(NMDA)受體導(dǎo)致鈣內(nèi)流增加。高Hcy可以促進(jìn)鈣離子內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi)線粒體對(duì)鈣離子的釋放，從而促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖。 硫酸鎂治療組在傷后2，6h Hcy含量較損傷組明顯降低(P< 0．01，<0．05)，在治療24 h后Hcy含量接近正常水平，提示硫酸鎂對(duì)Hcy有一定的抑制作用，因?yàn)殒V劑是鈣離子細(xì)胞內(nèi)流的天然拮抗劑。它可以抑制谷氨酸(Glu)受體的活化以及維持神經(jīng)細(xì)胞正常鈉、鉀離子濃度梯度緩解星形細(xì)胞水腫；減少傷后神經(jīng)細(xì)胞自由基的生成，防止脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)引起的細(xì)胞膜損害。另外硫酸鎂可以抑制Hcy的產(chǎn)生，從而有效地阻止其生物學(xué)作用的發(fā)揮，減輕腦損傷后的繼發(fā)性神經(jīng)細(xì)胞的進(jìn)一步損害。本組研究表明，Hcy在急性腦損傷后增加，它可以介導(dǎo)急性腦損傷后的繼發(fā)性炎癥反應(yīng)，參與急性腦損傷后的病理過(guò)程，臨床早期應(yīng)用硫酸鎂可以抑制體內(nèi)Hcy的水平升高，減輕急性腦損傷后繼發(fā)性的病理?yè)p害。

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